通常每周五上海恒遠都有資訊分享給大家，我公司今天要給大家?guī)淼膬?nèi)容是實驗室技術(shù)部對酶聯(lián)免疫雙位點一步法的評價，夏將此具體內(nèi)容整理出，發(fā)布出分享給大家。
·操作步驟
  1.將1個McAb與固相載體連接，形成固相McAb。洗滌除去未結(jié)合物。
  2.同時加入待檢標本和酶標McAb，溫育，是待檢抗原和固相McAb及酶標McAb反應(yīng)形成雙抗體夾心復合物。洗滌除去未結(jié)合物。
  3.加底物顯色。
    適用于雙抗體夾心法的酶聯(lián)免疫試劑盒，有些也可用雙位點一步法檢測。如HBsAg同樣可用此法進行檢測，其原理為：將純化的抗HBs吸附于固相載體表面，加入待檢血清(或血漿)，同時加入辣根過氧化物酶標記的另一個抗HBs(酶結(jié)合物)，如血清或血漿中含有HBsAg，則通過溫育形成固相McAb-HBsAg-酶標McAb復合物，加入底物，通過顯色反應(yīng)進行測定。若血清或血漿中不含HBsAg，通過洗滌除去未結(jié)合物，加底物后就不顯色。
    上海恒遠技術(shù)部做出評價：“由于應(yīng)用McAb，雙位點一步法具有很高特異性，一步法省時、簡便。當待檢抗原濃度過高時，大量過剩抗原分別飽和固相McAb和酶標McAb而抑制夾心復合物的形成，這種現(xiàn)象稱為鉤狀效應(yīng)，可出現(xiàn)假陰性結(jié)果。可將待檢標本稀釋后再做或提高抗體試劑的親和力、濃度、純度定以消除鉤狀效應(yīng)。”
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