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ELISA試驗結(jié)果為什么會出現(xiàn)負(fù)值

更新時間:2015-11-20 點(diǎn)擊量:3748

客戶經(jīng)常會問用兩個不同廠家的ELISA盒子測人血清中的TNF-α等指標(biāo)時都出現(xiàn)濃度負(fù)值, ,考慮是不是洗板洗得太過了還是反應(yīng)溫度不夠,做第二遍的時候?qū)?shí)驗方法,做了少許調(diào)整,將板置入36-37攝氏度的烘箱中反應(yīng),結(jié)果吸光度更低了,測的樣本的濃度仍然有很多負(fù)值,目前有兩個問題:1、目前的負(fù)值數(shù)據(jù)該怎么處理?2、為什么會出現(xiàn)這樣的問題?
現(xiàn)在讓我們恒遠(yuǎn)技術(shù)給您做出答復(fù):
血清中TNF-α值為負(fù)數(shù),可能有如下原因引起:
*、因為保存問題,TNF-α在血清中極易降解造成測量值很小。
第二、因為血清中一些物質(zhì)對測量有干擾,造成OD值較低,甚至低于0濃度的OD值,表現(xiàn)為負(fù)值。
第三、實(shí)驗溫度造成的,建議嚴(yán)格按照據(jù)說明書要求操作。
樣本正確保存方法:ELISA實(shí)驗血清、血漿樣本正確采集方法:檢測的樣本,及時儲存在4℃?zhèn)溆谩τ诟籼煸贆z測的樣本,及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的,-70℃凍存?zhèn)溆谩?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。