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實驗動物骨髓的采集法

更新時間:2012-09-05 點擊量:2576

     采集骨髓一般選擇胸骨、肋骨、髁骨、脛骨和股骨等造血功能活躍的骨組織。猴、犬、羊等大動物的骨髓的采集用活體穿刺取骨髓的方法;大、小鼠等小動物骨頭小難穿刺,只能剖殺后采胸骨、股骨的骨髓。(恒遠(yuǎn)生物銷售各種種屬酶聯(lián)免疫試劑盒

 

(一)猴、犬、羊等的骨髓采集法

1. 骨髓穿刺點定位

(1)胸骨:穿刺部位在胸骨中線,胸骨體與胸骨柄連接處,或選胸骨上1/3部。

(2)脛骨:穿刺部位在脛骨內(nèi)側(cè),脛骨上端的下方1厘米處。

(3)肋骨:穿刺部位在第5~7肋骨各自的中點上。

(4)髁骨:穿刺部位在髁前上棘后2~3厘米的髁嵴。

(5)股骨:穿刺部位在股骨內(nèi)側(cè)面,靠下端的凹面處。

2. 骨髓穿刺方法

(1)實驗動物按要求固定,穿刺部位去毛、消毒、麻醉,要求局部麻醉范圍直達(dá)骨膜,也可作全麻。

(2)操作人員帶消毒手套,確定穿刺點,估計從皮膚到骨髓的距離并依此固定骨髓穿刺針長度。左手拇、食指繃緊穿刺點周圍皮膚,右手持穿刺針在穿刺點垂直進(jìn)針,小弧度左右旋轉(zhuǎn)鉆入,當(dāng)有落空感時表示針尖已進(jìn)入骨髓腔。用左手固定穿刺針,右手抽出針芯,連接注射器緩慢抽吸骨髓組織,當(dāng)注射器內(nèi)抽到少許骨髓時立即停止抽吸,取出注射器將骨髓推注到載玻片上,迅速涂片數(shù)張,以備染色鏡檢。

(3)左手壓住穿刺點周圍皮膚,迅速拔出穿刺針,用棉球壓迫數(shù)分鐘。如穿刺的是肋骨,除壓迫止血外,還需膠布封貼穿刺點,防止發(fā)生氣胸。

(二)大鼠、小鼠的骨髓采集法

將實驗動物剖殺、固定,解剖取出股骨或胸骨,于第三胸骨節(jié)處剪斷,將其斷面的骨髓擠在有稀釋液的試管內(nèi)或玻片上,繼而涂片、染色、鏡檢。